飼料中粗脂肪的測(cè)定方法

粗脂肪是飼料中的一種重要物質(zhì)。檢測(cè)飼料中的粗脂肪含量有利于科學(xué)配比飼料，合理滿足動(dòng)物的能量需求，提高飼料的利用率。本文將介紹飼料中粗脂肪的測(cè)定方法。

原理

飼料中的粗脂肪是由不同類別的脂肪組成的。在測(cè)定過(guò)程中，酶水解把飼料中的脂肪轉(zhuǎn)化為甘油和游離脂肪酸。然后通過(guò)萃取和干燥，將游離脂肪酸轉(zhuǎn)化為甲酯。最后通過(guò)氣相色譜法分析甲酯，計(jì)算出飼料中粗脂肪的含量。

儀器和試劑

（1）酶：試劑盒中含有脂肪酶。

（2）硫酸甲酯：含有少量的BHT防腐劑。

（3）鹽酸：含有0.1M的鹽酸。

（4）甲苯：用于粗脂肪的萃取。

（5）己烷：甲酯化前，用于去除甲苯。

（6）氫氣（氣體純度≥9999%）：氣相色譜儀所需。

（7）超純水：用于實(shí)驗(yàn)室常規(guī)操作。

（8）蒸餾水：用于洗滌和稀釋試樣。

（9）質(zhì)量濃度為4mg/mL的C19:0內(nèi)標(biāo)溶液。

（10）試管、移液管、燒杯、濾紙等。

方法

（1）將100g粉狀飼料樣品稱取入脂肪分析容器中，加入2mL 鹽酸和2mL 水，并進(jìn)行浸泡3小時(shí)以上。

（2）通過(guò)濾紙將樣品過(guò)濾并均勻分配在酶解瓶中。加入5mL酶用于酶解樣品。

（3）加入5mL甲苯，熱攪，靜置至油水分離，取上層甲苯液，加入10mg氫氧化鈉，并去除甲苯。

（4）加入2mL硫酸甲酯，3次充分混合，并保持常溫酯化60min。

（5）加入10mL蒸餾水，并將樣品萃取3次，每次取5mL萃取液，將所有萃取液合并；并通過(guò)十分子濾膜微孔過(guò)濾。

（6）過(guò)濾后的樣品加入質(zhì)量濃度為4mg/mL的C19:0內(nèi)標(biāo)溶液，稀釋至適宜濃度，準(zhǔn)備好待測(cè)樣品溶液。

（7）在氣相色譜儀上進(jìn)行分析。

注意事項(xiàng)

（1）操作前要嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程。

（2）注意樣品中的各組分的含量水平，以選擇合適的樣品量進(jìn)行分析。

（3）保持環(huán)境清潔，防止樣品受到污染。

（4）在使用甲苯時(shí)，必須進(jìn)行有機(jī)操作。

（5）在操作過(guò)程中，嚴(yán)格遵守操作階段的要求，避免樣本交叉污染。

結(jié)論

采用上述方法可以測(cè)定飼料中粗脂肪的含量。該方法簡(jiǎn)便、快捷，且準(zhǔn)確性高。在實(shí)際應(yīng)用中，可以根據(jù)需要進(jìn)行合適的方法改進(jìn)和優(yōu)化，以適應(yīng)不同精度和樣品量的需要。